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Beyozol,总RNA抽提试剂
来源:互联网 作者:未知 发布时间:2006-08-21
Beyozol,总RNA抽提试剂
 
产品编号
产品名称
包装
价格
R0011
Beyozol,总RNA抽提试剂
100ml
388.00元
 
 
 
产品简介:
Ø 碧云天生产的Beyozol-总RNA抽提试剂是目前世界上最先进的总RNA抽提试剂之一。本产品采用和Trizol完全相似的原理和方
  可以采用和Trizol完全相同的方法进行操作,但价格有Trizol的30%!
Ø Beyozol对动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提均适用。
Ø  Beyozol抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.6-1.8。
Ø  每一百万细胞用Beyozol抽提可得5-15RNA;每毫克组织用Beyozol抽提可得1-10RNA。产量因细胞和组织不同而异。
Ø 抽提两个样品约需一小时。
Ø Beyozol抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay, cDNA克隆,以及RT-
  PCR。 
Ø 每100ml Beyozol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。
 
包装清单:
 
产品编号
产品名称
包装
R0011
Beyozol
100ml
说明书
1份
 
保存条件:
  4℃保存,本试剂自订购之日起一年内有效。
 
注意事项:
Ø 需自备氯仿,异丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPCDEPC水可向碧云天订购。
Ø 所有离心管,枪头及相关溶液都必需无RNA酶污染。耐高温器物可150烘烤4小时以除去RNA酶,其它器物除RNA酶可考虑0.01%
  的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比)diethylpyrocarbonateDEPC至重蒸水MiliQ
  级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
Ø 必需戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。
Ø Beyozol含有毒物质苯酚,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触 Beyozol,请
  立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
Ø Beyozol抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但尚未经测试。有兴趣者可按Trizol的操作步骤进行操作。
Ø  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
使用说明:
1. 细胞裂解或组织匀浆。
  a. 贴壁细胞
    吸尽培养液,每 10平方厘米细胞加入1ml Beyozol。一般六孔板每孔加1ml,12孔板每孔加 0.5ml。晃动3-5下,再用枪吹打
2-3下,确保全部裂解,然后吸至离心管中。
  b. 悬浮细胞
   离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万动植物或酵母细胞,或一千万细菌,加入1mlBeyozol。用枪吹打或适当vortex
确保全部裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,确保全部裂解。
  c. 组织
  先将组织剪切成小块,放入普通玻璃匀浆器内。每50mg-80mg组织加入1ml Beyozol,匀浆。
2. 对于某些蛋白,多糖或脂含量很高的细胞或组织,Beyozol 裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物。需12,000g 4℃ 离心10
  分钟,然后吸取澄清的Beyozol裂解产物至一新的离心管中。
3. 室温放置5分钟,使样品充分裂解。
4. 每毫升Beyozol加入0.2ml氯仿vortex混匀或猛烈晃动15秒,室温放置2-3分钟。
5. 12,000g 4℃离心15分钟,然后吸取含总RNA的上层水相至一新的离心管中,每毫升Beyozol约可吸取0.5-0.55ml
6. 按每毫升最初的Beyozol加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟
7. 12,000g 4℃离心10分钟,在管底可见胶状RNA沉淀,弃上清。
8. 每毫升最初的Beyozol加入1ml75%乙醇,vortex或颠倒混匀
9. 7,500g 4℃离心5分钟,弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm, 离心1秒),小心吸尽液体。
10. 待RNA略干后,加入20DEPC水溶解,-70℃冻存。注意,RNA过分干燥,否则将极难溶解,且测出的A260/280值会切勿让
  低于1.6。
 
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