dedecms织梦内容管理系统
首页 | 生物前沿 | 生物考研 | 生物文档 | 实验操作 | 图片库 | 健康专栏 | 论文写作 | 生物电子书 | 专题 | 会员中心 | 支持论坛
当前位置:首页>生物文档>文章内容
一步一步学流式(1)--流式细胞术的历史
来源:丁香园 作者:未知 发布时间:2006-08-22
    概要说来,流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计数技术,以及数据的采集和分析技术等。FCM目前发展的水平凝聚了半个世纪以来人们在这方面的心血和成果。

  1934年,Moldavan1首次提出了使悬浮的单个血红细胞等流过玻璃毛细管,在亮视野下用显微镜进行计数,并用光电记录装置计测的设想,在此之前,人们还习惯于测量静止的细胞,因为要使单个细胞顺次流过狭窄管道容易造成较大的细胞和细胞团块的淤阻。1953年Crosland –Taylor根据雷诺对牛顿流体在圆形管中流动规律的研究认识到:管中轴线流过的鞘液流速越快,载物通过的能力越强,并具有较强的流体动力聚集作用。于是设计了一个流动室,使待分析的细胞悬浮液都集聚在圆管轴线附近流过,外层包围着鞘液;细胞悬浮液和鞘液都在作层液。这就奠定了现代流式细胞术中的液流技术基础。

  1956年,Coulter在多年研究的基础上利用Coulter效应生产了Coulter 计数器。其基本原理是:使细胞通过一个小孔,只在细胞与悬浮的介质之间存在着导电性上的差异,便会影响小孔道的电阻特性,从而形成电脉冲信号,测量电脉冲的强度和个数则可获得有关细胞大小和数目方面的信息。1967年Holm等设计了通过汞弧光灯激发荧光染色的细胞,再由光电检测设备计数的装置。1973年Steinkamp设计了一种利用激光激发双色荧光色素标记的细胞,既能分析计数,又能进行细胞分选的装置。这样就基本完成了现代FCM计数技术的主要历程。

  现代的FCM数据采集和分析技术是从组织化学发源的,其开拓者是Kamentsky。1965年,Kamentsky在组织化学的基础上提出了两个新设想:(1)细胞的组分是可以用光光度学来定量测定的,即分光光度术可以定量地获得有关细胞组织化学的重要信息。(2)细胞的不同组分可以同时进行多参数测量,从而可以对细胞进行分类。换句话说,对同一细胞可以同时获得有关不同组分的多方面信息,用作鉴别细胞的依据。

  流式细胞术在细胞化学中的应用的先驱者是Van Dilla和美国的Los Alamos小组。他们在1967年研制出流液束、照明光轴、检测系统光轴三者相互正交的流式细胞计的基础上,首次用荧光Feulgen反应对DNA染色显示出DNA的活性与荧光之间存在着线性关系,并在DNA的直方图上清楚地显示出细胞周期的各个时相。Gohde 和Dittrich接着把这项技术推向实用,他们用流式细胞术测定细胞周期借以研究细胞药代动力学问题。FCM用于免疫组织化学中的关键是对细胞进行免疫荧光染色,其它和在细胞化学的应用并没有多大差异。(下图为一DNA直方图)

[收藏] [推荐] [评论(0条)] [返回顶部] [打印本页] [关闭窗口]
用户名: 新注册) 密码: 匿名评论
评论内容:(不能超过250字,需审核后才会公布,请自觉遵守互联网相关政策法规。
§最新评论:
热点文章
·电泳技术简介
·PCR反应体系与反应条件
·PCR引物设计及相关软件使用
·RNA抽提指南(TRIZOL)
·定量PCR常见问题解答
·电泳技术专题
·DNA的凝胶电泳
·聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物
·引物设计总结
·什么是PET塑料
·透析袋概述
·PCR技术概论
相关文章
·一步一步学流式(2)--流式细胞
·一步一步学流式(3)--安全问题
·一步一步学流式(4)--学看流式
·一步一步学流式(5)--常用流式
·一步一步学流式(6)--关于补偿
·细胞冻存、解冻方法与细胞计数
·Beyozol,总RNA抽提试剂
·血管紧张素Ⅱ上调自发性高血压大
·减少PCR产物中引物二聚体的方法
·一步实现单拷贝到高拷贝的转换--
·血清稀释液配制
·TSS方法制备感受态细菌(一步法
Power by DedeCms