图1-1 colE1复制子中DNA的合成:RNAⅠ和RNAⅢ的相互作用 (A)colE1复制子的遗传学图潜及其此区域的转录模式。(B) RNAⅡ充当colE1复制子中DNA合成的引物。合成RNAⅡ的过程中，新生RNA分子的5'区折叠成一种特定构型，从而使不断延伸的3'端与复制起点上的DNA模板形成稳定的DNA-RNA杂交体。RNA H将RNA的3’区加工成DNA聚合酶I合成前导链的引物。(C)与Rom/Rop二聚体蛋白结合，使RNA I与RNAll形成稳定的“亲吻”复合物。(D) RNAⅠ和RNAⅢ之间“亲吻复合物”的放大。由RNAI和RNAⅡ形成稳定的复合物通过抑制ANAB与DNA稳定杂交体的形成而阻止DNA合成。

  RNAI与RNAⅡ相互作用的机制曾由Tomizawa及其同事做过详细阐述(Tarnizawa 1990a)。图中显示RNAⅠ与RNAⅡ短寿命折叠中间体间的一种动力学相互作用。当新生RNAⅡ转录物的长度在80~360个核苷酸之间时，其折叠特别容易受到RNAⅠ的干扰。结合首次发生于这两个RNA分子的茎环结构，导致RNA II的5'区与全程RNAⅠ形成一段双链RNA。因此. RNAⅠ作为质粒DNA合成起始的负调节物控制质粒拷贝数。

pUC质位家族的拷贝数远远高于携带pMB1或colE1复制子的其他质粒的拷贝数。这是由于pUc质粒带有一个点突变，可依温度不同改变正调节分子(RNAⅡ)的二级结构。在37℃或42℃下，RNAⅡ似乎折叠成抗RNAⅠ抑制的构型。于是DNA合成的起始加强、结果拷贝数特别高。当细苗生长于30℃时，pUC质粒的拷贝数恢复正常(Lin-Chap et al.1992 )。

    解释维持质粒拷贝数的最简单假说是胞质内RNAⅠ的稳态浓度是由基因剂量决定的(Tomizawa 1987;Chiang and Brerner 1991)。如果质粒的拷贝数高出正常值，RNAⅠ的浓度便上升，质粒DNA的复制受抑制。不过只有RNA i的半衰期较短(Pritehard 1984)和RNAⅠ的降解速率与细菌的生长速率成比例时，质粒拷贝数与抑制剂浓度波动之间的这种关联才能发生。在细胞的正常生长条件下，这两种情况似乎都会发生，此时RNA工的半衰期为1~2 min。动力学计算显示这一时期足够短，以至该分子可以作为质粒拷贝数的实时监测器(Brendel and Perelsan 1993)。
    RNAⅠ的降解过程分为两个阶段。首先，由RNaseE将其5'端的5个核苷酸切除，所形成的截短分子仍能与RNAⅡ结合，但易被一种核糖核酸酶降解，该酶的活性对生长速度敏感(Lin-Chan and Cohen 1991)。此种调节提供了维持恒定质粒拷贝数的机制，即使在细胞呈间歇式生长时亦不例外。