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TB 配制：500ml/瓶
bacto-tryptone 6 g
bacto-yeast extract 12 g
甘油 2 ml
加水定容至450ml
100ml磷酸缓冲液: KH2PO4 2.31g
K2HPO4。3H2O 16.43 g
加水至总体积为100 ml
分开灭菌121℃湿热灭菌20分钟，待温度降至60℃后再加入50ml磷酸缓冲液，混匀。
质粒抽提溶液（I,II,III,IV）
Solution I 配制：1000ml/瓶
TrisHCl (pH8.0) : (1M Tris-HCl pH8.0) 50 ml
EDTA : (0.5M EDTA pH8.0) 20 ml
加ddH2O定容至: 930 ml
附：1M Tris-HCl (pH8.0) 配制： 500ml
Tris-base 称量 60.5g
加水400ml溶解
加入HCl 42ml 后
继续用HCl调pH至8.0
加ddH2O定容至500ml
0.5M EDTA (pH8.0) 配制： 500ml
EDTA钠盐 93.06g
NaOH 10g
加水400ml溶解
用1N NaOH调pH至8.0
最后定容至500ml
Solution II: 配制：
使用前新鲜配制：
miniprep:
200ul/管 10M NaOH 4 ul
10% SDS 20 ul
ddH2O 176 ul
macroprep:
10ml/管 10M NaOH 200 ul
10% SDS 1000 ul
ddH2O 8.8 ml
10M NaOH
配制：500ml (装于塑料瓶中) 称量 NaOH 200 g
10% SDS
配制：500ml 称量 SDS 50 g（加热溶解）
Solution III 配制： 1000ml/瓶
5M KAc 600 ml
冰醋酸 115 ml
ddH2O 285 ml
Solution IV 配制： 200ml/瓶
NaCl 称量 18.7g
PEG-6000称量 26g
加ddH2O定容至 200ml
TE 配制： 500ml/瓶
Tris-HCl (1M Tris-HCl pH8.0) 5ml
EDTA (0.5M EDTA pH8.0) 1ml
加ddH2O定容至 494ml
RTE 配制： 50ml/管
TE 49.5ml
分装好的RNase(10mg/ml) 0.5ml
接种200ul菌种于30ml 的TB中，37℃，300rpm的摇床中培养过夜，将菌倒入50ml的离心管，4℃离心10min，弃上清，加入5ml溶液I，剧烈震荡混匀；加入10ml溶液II，轻轻颠倒混匀，加入7.5ml的溶液III，混匀后4℃，4000rpm离心10min，上清通过两层纱布过滤到一洁净的50ml离心管中，然后加入0.6倍体积的异丙醇，混匀后4℃，4000rpm离心15min；弃上清，沉淀中加入1ml含有0.1mg/ml的RNA酶的TE，放入37℃-55℃水浴30min，加入1ml 溶液IV，混匀后4℃，4000rpm离心15min；弃上清，沉淀加入0.4mlTE，溶解后加入等体积的酚/氯仿，混匀后室温12000rpm离心4min，将上清移入一新的洁净Eppendorf管中，用酚/氯仿重复抽提一次，上清中加入2.5倍体积的无水乙醇，混匀后室温12000rpm离心4min，沉淀用75%乙醇洗涤一遍，溶于0.2-0.4mlTE中，65℃放置10min，测定OD值。4℃冻存备用
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