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冯永强 阎小君 苏成芝
PicoGreen dsDNA Quantitation Reagent
最近，Molecular Probes公司推出了一种新型的 dsDNA荧光燃料，为核酸的高灵敏度检测提供了一种新的方式。该燃料与 DNA双链具有较高的亲和力，结合后荧光强度大大增加，特别适合对溶液 dsDNA 的检测、分析。它的主要优点有：
1.灵敏度高：用 PicoGreen可以确切地检测出少至 25pg/mL的 dsDNA分子（用标准荧光检测器检测）或 250pg/mL dsDNA(用荧光酶标仪检测 )，远远超出传统紫外（ A260）检测法的灵敏度，而以前最好的检测试剂（ YO-PRO-1和 YOYO-1等）也最多可检测到 2.5ng/mL或 0.5ng/mL dsDNA。
2.线性范围广：如用标准荧光检测器检测其线性范围可含盖 4个数量级，从 25pg/mL到 1μ g/mL。
3.性能 /造价比高：明显优于其它高灵敏度检测方法，如 Hoechst 33258法。
4.RNA、 ssDNA及其它物质的影响小：研究证实即使将 ssDNA、 RNA与 dsDNA等比例混合在测试中前二者本身也不会产生明显的荧光信号；而且，一定浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖也不会对线性情况产生影响。
这些独特的优点使 PicoGreen dsDNA 检测法在 dsDNA 的液相检测中既灵敏又简便易行，并有望成为大量分子生物学实验中 dsDNA 产率精确测定的标准方法。例如，用来测定 PCR 反应前后溶液双链 DNA 的量、 PCR 扩增产率以及生物制品被 DNA污染的程度等。
Bibliography
1. Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals
2. BioTechniques 21,372(1996)
3. Nucleic Acids Res 24,2623(1996)
4. BioTechniques 20,676(1996)
5. J. of Immunological Methods 211(1998)159-169
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