病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力，谓之中和试验。本试验主要用于：①从待检血清中检出抗体，或从病料中检出病毒，从而诊断病毒性传染病；②用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型；③测定抗病毒血清或抗毒素效价；④新分离病毒的鉴定和分型，中和试验不仅可在易感的实验动物体内进行，亦可在细胞培养上或鸡胚上进行。试验方法主要有简单定性试验、固定血清稀释病毒法、固定病毒稀释血清法、空斑减少法等。

在细胞培养上进行病毒中和试验，近年来多采用空斑减少法。先将病毒稀释成适当浓度，使每0.2ml含80个～100个PFU（空斑形成单位），与不同稀释度的待检血清等量混合，置37℃作用1h～2h，分别测定PFU，使空斑减少50％血清稀释度即为该血清的中和价。

表 空斑减少法中和试验示例

血清稀 释倍数[1]		1:16 (4-2)	1:64 (4-3)	1:256 (4-4)	1:1024 (4-5)	1:409 (4-6)	不加 血清 对照	中和抗 体价[2]
待检血清A	空斑数	3	13	38	51	53	55	4-3.6=1:140
	空斑减少率	95％	76％	31％	7％	0％
待检血清B	空斑数	－	8	25	51	56	55	4-4.1=1:290
	空斑减率数	－	85％	54％	7％	0％
待检血清C	空斑数	－	－	6	22	44	55	4-5.2=1:1300
	空斑减少率	－	－	89％	59％	19％

注：[1] 血清用4倍递增稀释；

[2] 空斑减少50％的血清稀释度，其计算法同LD₅₀的计算。