Invitrogen 一步qRT-PCR系统整合了最强大的反转录酶和DNA聚合酶技术，提供灵敏的实时定量RT-PCR结果。一步方式速度快、使用方便而且反应与反应之间的差异小。

The SuperScript® III Platinum® One-Step qRT-PCR Kits 可以利用荧光引物和探针以及SYBR® Green I染料。两种试剂盒均整合了高产率的SuperScript® III 反转录酶（RT）和具有热启动特异性的Platinum® Taq DNA 聚合酶，以方便的一步方式提供精确的基因表达分析。

*	更高cDNA合成温度的SuperScript® III ，提供针对困难RNA二级结构更大的成功
*	具有热启动特异性的Platinum® Taq DNA 聚合酶，提高特异性
*	LUX®荧光引物或者双标荧光探针卓越的性能（ 图13 和 14 ）
*	SYBR® Green I 染料简单方便的检测（ 图15 和 16 ）
*	多种实时仪器平台上已经验证的性能

图13 SuperScript® III Platinum® One-Step qRT-PCR Kit优于其它一步qRT-PCR试剂盒





使用invitrogen SuperScript® III Platinum® One-Step qRT-PCR Kit（红色数据）或者ABI TaqMan® One-Step RT-PCR Master Mix（蓝色数据），10倍系列稀释的HeLa总RNA（100ng到0.1pg），200 nM 每种扩增引物，100nM TaqMan®探针和ROX Reference Dye，通过实时RT-PCR定量β -actin靶标。50℃ 进行cDNA合成15分钟，接着使用ABI PRISM® 7700进行40个PCR循环。

使用invitrogen SuperScript® III Platinum® One-Step qRT-PCR Kit（红色数据）或者Qiagen Quantitect® Probe RT-PCR Kit（蓝色数据），10倍系列稀释的HeLa总RNA（100ng到0.1pg），200 nM 每种扩增引物，100nM TaqMan®探针和ROX Reference Dye，通过实时RT-PCR定量β -actin靶标。50℃ 进行cDNA合成15分钟，接着使用ABI PRISM® 7700进行40个PCR循环。

图15 SuperScript® III Platinum® SYBR® Green One-Step qRT-PCR Kit在较宽的动态范围内提供方便的检测



使用SuperScript® III Platinum® SYBR® Green One-Step qRT-PCR Kit，200 nM GAPDH引物，10倍系列稀释的HeLa总RNA（100ng到0.1pg）进行实时PCR..所有的反应在ABI PRISM® 7700上进行，反应步骤：50℃ RT 3分钟，接着进行50个循环，95℃ 15秒；60℃ 30秒。

图16 SuperScript® III Platinum® SYBR® Green One-Step qRT-PCR Kit优于竞争对手


Panel A: 使用invitrogen SuperScript® III Platinum® SYBR® Green One-Step qRT-PCR Kit（红线 标准曲线：y = -3.57x + 31.05; R = 0.998）或者Qiagen QuantiTect® SYBR® Green RT-PCR Kit（蓝线 标准曲线：y = -3.612x + 32.10; R = 0.981），200 nM β -actin引物，10倍系列稀释的HeLa总RNA（100ng到0.1pg），按照每个生产商提供的操作步骤进行实时PCR。反应在ABI PRISM® 7700上进行。


Panel B: 使用invitrogen的SuperScript® III Platinum® SYBR® Green One-Step qRT-PCR Kit（红线 标准曲线：y = -3.52x + 31.15; R PCR Kit （红线 标准曲线：y = -3.52x + 31.15; R = 0.995）或者Stratagene的QuantiTect® SYBR® Green RT-PCR Kit（蓝线 标准曲线：y = -3.893x + 32.89; R = 0.996)，200 nM β -actin引物，10倍系列稀释的HeLa总RNA（100ng到0.1pg），按照每个生产商提供的操作步骤进行实时PCR。反应在ABI PRISM® 7700上进行。

图18 高产量Platinum® Quantitative RT-PCR ThermoScript® One-Step System