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SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kits以灵活的两步形式提供灵敏而特异的qPCR。这个试剂盒是由独立的RT和PCR模块组成,为您提供由一次cDNA反应产物进行多次PCR反应的灵活性。两种不同的试剂盒配置为您提供了不同检测方法选择:
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SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit 包含Platinum® Quantitative PCR SuperMix-UDG,提供使用LUX®荧光引物( 图5 )或者双标荧光探针( 图6 )的灵敏、特异的检测。
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图5 SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit提供使用LUX®荧光引物的特异检测
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使用10倍系列稀释(100ng到10pg)的HeLa cDNA,200nM JOE标记的LUX®引物, 200nM 未标记的LUX®引物,SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit和ROX Reference Dye,对人SDHA基因进行实时PCR定量。反应在50℃孵育2分钟,然后 95℃ 2分钟,接着进行50循环,95℃ 15秒 60℃ 30秒; 仪器使用ABI PRISM® 7700。
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图6 SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit提供使用TaqMan®探针的灵敏的检测
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使用10倍系列稀释(50ng到5pg)的HeLa cDNA,200nM每种扩增引物,100nM TaqMan®探针,SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit和ROX Reference Dye,对人18srRNA进行实时PCR定量。反应在50℃孵育2分钟,然后 95℃ 2分钟,接着进行50循环,95℃ 15秒 60℃ 30秒; 仪器使用ABI PRISM® 7700。
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SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit with SYBR® Green 包含Platinum® SYBR® Green qPCR SuperMix-UDG,提供使用SYBR® Green I 染料简单而方便的检测( 图7 )。
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SuperScript® III 反转录酶高达55℃的cDNA合成,为您的困难的RNA二级结构模板提供更好的结果
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包含热启动技术的Platinum® Taq DNA Polymerase提供更高的特异性
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高通量RT程序提供更加快速的反应组合,减少了错误发生的概率,同时没有性能的 损失
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与大部分实时仪器平台兼容( 图8 )
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低至5pg总RNA灵敏的定量
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进行50/100 或者 250/500 cDNA合成/PCR反应的充足试剂,分别可以进行100和 500反应的试剂盒。
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图7 SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit with SYBR® Green提供使用SYBR® Green I 染料简单而方便的检测
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使用10倍系列稀释(100ng到10pg)的HeLa cDNA,200nM每种扩增引物,SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit with SYBR® Green和ROX Reference Dye,对人GAPDH进行实时PCR定量。反应在50℃孵育2分钟,然后 95℃ 2分钟,接着进行50循环,95℃ 15秒 60℃ 30秒; 仪器使用ABI PRISM® 7700。
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图8 优化为Roche LightCycler®使用的SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit
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使用10倍系列稀释(100ng到10pg)的HeLa cDNA,500nM FAM标记的LUX®引物, 500nM 未标记的LUX®引物,SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit和250 μg/ml BSA,对人SDHA基因进行实时PCR定量。反应在50℃孵育2分钟,然后 95℃ 2分钟,接着进行50循环,95℃ 5秒 55℃ 10秒 72℃ 10秒; 仪器使用Roche LightCycler®。 进行50循环 ,95℃ 5秒 55℃ 10秒 72℃ 10秒; 仪器使用Roche LightCycler®。
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| 产 品 |
规 格 |
目录号 |
价 格 |
| SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit |
100反应 |
11734-050 |
查 询 |
| 500反应 |
11734-068 |
查 询 |
| SuperScript® III Platinum® Two-Step qRT-PCR Kit with SYBR® Green |
100反应 |
11735-032 |
查 询 |
| 500反应 |
11735-040 |
查 询 |
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