dedecms织梦内容管理系统
首页 | 生物前沿 | 生物考研 | 生物文档 | 实验操作 | 图片库 | 健康专栏 | 论文写作 | 生物电子书 | 专题 | 会员中心 | 支持论坛
当前位置:首页>生物文档>文章内容
盐析法纯化免疫球蛋白
来源:互联网 作者:未知 发布时间:2006-12-16

(一) 原理

  蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度,以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液,中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质,于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。同时,中性盐加入蛋白质溶液后,由于离子强度发生改变,蛋白质表面电荷大量被中和,更加导致蛋白溶解度降低,使蛋白质分子之间聚集而沉淀。

(二) 主要材料

  1. 试剂:

  (1) 正常人混合血清;灭菌生理盐水。

  (2) 饱和硫酸铵溶液的配制:

  称(NH4)2SO4(AR)400~425克,以50~80℃之蒸馏水500ml溶解,搅拌20分钟,趁热过滤。冷却后以浓氨水(15N NH4OH)调PH至7.4。配制好的饱和硫酸铵,瓶底应有结晶析出。

  (3) 萘氏试剂配制:

  称HgI11.5克,KI8克,加蒸馏水至50ml,搅拌溶解后,再加入20%NaOH 50ml。

  (4) 0.02M, PH7.4磷酸盐缓冲盐液(Phosphate Buffered Saline PBS)配制:

  贮存液:

  A液:0.2M Na2HPO4:Na2HPO4·12H2O 71.64克,加蒸馏水至1000ml;

  B液: 0.2M NaH2P4:NaH2P4·2H2O 3.12克,加蒸馏水至1000ml;

  应用液:取A液81ml加B液19ml混合,再以生理盐水作10倍稀释即成。

  (5) 0.1M, PH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer PB)配制:

  将上述A液取81ml与B液19ml混合,再以蒸馏水对倍稀释即成。

  (6) 20%磺基水杨酸。

  2. 器材:

  普通冰箱、离心机、电磁搅拌器,751

[收藏] [推荐] [评论(0条)] [返回顶部] [打印本页] [关闭窗口]
用户名: 新注册) 密码: 匿名评论
评论内容:(不能超过250字,需审核后才会公布,请自觉遵守互联网相关政策法规。
§最新评论:
热点文章
·电泳技术简介
·PCR反应体系与反应条件
·PCR引物设计及相关软件使用
·RNA抽提指南(TRIZOL)
·定量PCR常见问题解答
·电泳技术专题
·DNA的凝胶电泳
·聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物
·引物设计总结
·什么是PET塑料
·透析袋概述
·PCR技术概论
相关文章
·DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化免
·Sepharose CL-4B亲和柱层析纯化I
·高效液相色谱纯化小鼠腹水中单克
·单克隆抗体(McAb)亲和层析柱纯化
·液相色谱常用符号与术语表
·色谱常用术语表
·凝胶色谱法
·蛋白柱常见问题和日常维护
·超临界流体萃取技术
·蛋白质降解:生物科技的热门领域
·色谱柱的使用和维护
·包涵体表达的蛋白的复性
Power by DedeCms