表皮细胞培养
日期:2006-08-06 23:39:45
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高压电泳技术
日期:2006-08-06 23:39:45
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(一)原理 同普通电泳。普通电泳的电压一般为2V/cm~20V/cm,电泳时间需1小时至数小时。电泳时间越长,扩散越严重。对于一些小分子的物质如核苷酸、氨基酸、多肽等,在常压电泳中,往往达不到分离的目的。高压电泳则能使分子量相近的物质充分地进行分离。在高压电泳中
寡核苷酸的优化设计
日期:2006-08-06 23:39:45
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在核酸分子杂交、DNA序列测定和通过PCR放大DNA片段等实验中,都需要使用寡核苷酸作为探针或引物,而对这些反应的质量起最重要影响作用的,就是这些寡核苷酸探针或引物。用优化的寡核苷酸进行实验能够很快得到好的结果,而用不够合适的寡核苷酸时,常常得出似是而非的结
四级结构分析
日期:2006-08-06 23:39:45
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杂交
日期:2006-08-06 23:39:45
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互补杂交 要根据探针的类型、长度以及研究目的来选择优化杂交条件。如用于基因表达检测,杂交时需要高盐浓度、样品浓度高、低温和长时间(往往要求过夜),但严谨性要求则比较低,这有利于增加检测的特异性和低拷贝基因检测的灵敏度;若用于突变检测,要鉴别出单碱基错配
图象的采集和分析
日期:2006-08-06 23:39:45
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当生物芯片和样品探针杂交完毕后,就需要对杂交结果进行图象采集和分析。一般膜芯片的杂交都用同位素p32、p33作标记,其信号的检测需通过传统的磷光成像系统来完成。而对于用荧光标记的玻璃芯片杂交后的检测,则需要用专门的荧光芯片扫描仪。 1. 磷感屏成像系统Cyclone
核酸杂交
日期:2006-08-06 23:39:45
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核酸杂交是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双边结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品的不
DNA的吸印转移法(Southern Blot)
日期:2006-08-06 23:39:45
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DNA经过限制性内切酶消化和凝胶电泳后,放入碱性溶液中使其变性,将变性后的单链DNA从凝胶中按原来位置和顺序用滤纸吸印转移到硝酸纤维膜上,然后再与标记探针杂交。此方法比较准确地保持了特异DNA序列在电泳图谱中的位置,而且能测定分子量。 试剂:变性液:0.5mol/L
Northern印迹杂交
日期:2006-08-06 23:39:45
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Northern印迹杂交(Northern blot)。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建,称为Southern印迹技术,RNA印迹技术正好与DNA相对应,故被称为Northern印迹杂交,与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot
芯片的构建和阅读
日期:2006-08-06 23:39:45
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摘要 制作芯片和获得芯片的数据有许多不同的方法。这里我们介绍了在学术领域中两种芯片的构建和使用。除了详细说明了技术细节外,我们还对组成和方法的优缺点进行了评论,同时还介绍了杂交的方法。用我们所建立和使用芯片的方法来回答生物领域问题的事实证明了这种技术
组织原位杂交(Tissue in situ hybridization)
日期:2006-08-06 23:39:45
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组织原位杂交简称原位杂交,指组织或细胞的原位杂交,它与菌落的原位杂交不同。菌落原位杂交需裂解细菌释出DNA,然后进行杂交。而原位杂交是经适当处理后,使细胞通透性增加,让探针进入细胞内与DNA或RNA杂交。因此原位杂交可以确定探针的互补序列在胞内的空间位置,这
酶分子的改造技术
日期:2006-08-06 21:13:05
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由于酶具有反应专一性、催化效率高及反应条件温和等优点,因此在工业、农业、医药和环保等方面已经得到越来越多的应用。但总体还没有达到大规模应用的程度,其主要原因在于酶自身性质上的一些不足,如不稳定性、对pH的要求严格以及具有抗原性等等。因此,人们希望通过
肿瘤细胞培养方法简介
日期:2006-08-06 20:50:30
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一、机械刮除法 1.标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。 2.刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入瓶皿中,肉眼或显微镜窥视下,刮除无标记空间。 3.用Hanks液冲洗一两次,洗除被刮掉的细胞。 4.注入培养液继续培养,如发现仍有成纤维细
激光显微细胞分离技术
日期:2006-08-06 20:50:30
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在基础医学研究中涉及越来越多的如某一疾病状态组织中,多种基因或遗传变化,区别发展中的组织细胞群以及疾病状态组织细胞,将有助于了解疾病发生的分子机制。因此,在下一代的分子分析方法将需要进入微观世界及自动化程度高。对某一特殊个体的切片进行遗传指纹图谱鉴
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