实验题目：电泳技术
教    师：XXX

实验类型：基本技术
学　　时：　4　　　　

内　　容：

一、仪器设备 等电聚焦电泳、梯度电泳、纸上电泳、醋酸纤维薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳等所需的电泳仪、电泳槽、制胶模具和所需试剂等。

二、仪器结构 

 

三、原　　理

    电泳就是带电荷的样品在电场力的作用下，以不同的迁移行为而彼此得以分离的方法。根据其载体介质的不同可以分为等电聚焦电泳、梯度电泳、纸上电泳、醋酸纤维薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳等。

许多生物分子都带有电荷，其电荷的多少取决于分子结构机器所在介质的pH和组成。由于混合物中各组分所带电荷性质、电荷数量以及相对分子质量的不同，在同一电场的作用下，各组分泳动的方向和速率也有差异。因此，在一定时间内各组分移动的距离也不同，从而达到分离鉴定各组分的目的。

在电泳的过程种药品会受到电场力、分子筛作用、静电吸附作用、共价结合作用等等方面的作用力。药品在这些作用力的综合作用下，泳动的速度产生差异，从而将不同的组分分离开来。

电泳的介质不同，则电泳的功能也不大相同，其所最适用的方向也是不一样的，最终检测的指标也是不一样的。等电聚焦电泳常用于测定蛋白质的等电点，他最后测定的指标就是pH值。琼脂糖凝胶最常应用于核酸的检测之中，最后是以分子量的大小来衡量电泳结果的。

 

四、适用范围

a)  主要应用于分离各种有机物（氨基酸、多肽、蛋白质、酶、脂类、核苷、核苷酸、核酸等）。

b)  可用于分析物质的纯度。

c) 用于测定相对分子量。

d) 与层析连用可用于蛋白质结构分析。

 

五、操作步骤

1．配制胶并且将电泳装置连接好。

2．点样，点样量大小要合适。

3．选择合适的电压进行电泳。

4．染色或者处理凝胶，检验电泳结果。

 

六、注意事项

1．要选择合适的点样量。

2．选择合适的电压或者电流，并设定合适的程序。

 

七、思考题

1．电泳结果不好可能有哪些方面的原因？

⒉电泳时的电压根据什么作出选择的？