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实验题目:消毒、灭菌与无菌操作技术 教 师:XXX
实验类型:基本技术 学 时:6 (参考)
内 容:
一、仪器设备
手提式高压灭菌锅、立式高压灭菌锅、全自动高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、无菌室、酒精灯 滤菌过滤器
二、仪器结构
灭菌器:安全阀 压力表 放气阀 软管 紧固螺栓 灭菌桶 筛架 水(各种型号的结构有些不同,但是原理是一样的)
超净工作台:开关 风力调节器 灯开关
烘箱:电源开关 设温旋钮 显示屏
三、原理
1. 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的
2. 湿热灭菌是物品放入密闭的加压灭菌锅内加热,产生蒸汽,排除冷空气后密闭,使蒸汽不溢出,
增大压强,使水的沸点升高,高于100℃,导致菌体蛋白质凝固变性达到目的
3. 过滤除菌主要是选用孔径小的微孔材料制作成专门的细菌滤器,通过减压过滤,达到除菌。
4. 紫外线灭菌是指在波长200nm-300nm之间,紫外线诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交
联,从而抑制了DNA的复制达到灭菌。另外,由于辐射使空气中的氧电离成氧离子,氧离子再把氧气氧化成臭氧或使水被氧化为双氧水,臭氧和双氧水都有杀菌的作用。
5. 化学药品灭菌是应用能抑制或杀死微生物的化学制剂进行消毒灭菌的。
四、适用范围
适用于任何无菌操作的实验。如:细胞传代培养、植物组织培养、细菌接种、微生物的分离纯化等各种高压蒸汽灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌的原理和操作技术;无菌室、超净工作台的使用和在酒精灯火焰旁接种技术
五、操作步骤
各种高压蒸汽灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌的原理和操作技术;无菌室、超净工作台的使用和在酒精灯火焰旁接种技术
六、注意事项
高压蒸汽灭菌开始前要把冷空气排尽,灭菌后要待压力降到“0”时才打开排气阀;烘箱灭菌要注意被灭菌物的灭菌温度;紫外线灭菌不要让紫外线照射人的皮肤;无菌室要定期用甲醛蒸汽熏蒸
七、思考题
1.为什么灭菌器内需要灭菌的物品不能摆的太密?
2.干燥箱灭菌的温度是多少?灭菌结束后要注意什么?
3.比较干燥箱灭菌和高压灭菌器灭菌的优缺点,并说出原因。
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