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实验题目：牛乳中蛋白的分离、纯化与鉴定
教 师：XXX
实验类型：设计
学 时：20(参考)
内 容：
一、实验目的
1从牛乳中提取酪蛋白，并对其进行纯化。
2 鉴定纯化后酪蛋白的纯度及酪蛋白的含量。
3学习新的实验方法，培养科学的实验作风。
二、实验原理
1 利用酪蛋白在其等电点时（ph=4.8）溶解度最小，使其等电点时沉淀，除去其它蛋白质和脂类，得到粗产品，并利用其不溶于乙醇，初步纯化。
2用电泳技术将产品酪蛋白电泳带与标准酪蛋白的电泳带做对比可判断产品是否为酪蛋白。
3 利用SDS-PAGE法和分光光度法鉴定酪蛋白纯度。
4由于酪蛋白在其等电点（PH=4.8）时溶解度最小，又不溶于乙醇，所以可用缓冲液调PH至4.8，用乙醇沉淀此产品。
三、试剂与器材
紫外分光光度计、离心机、水浴锅、电磁搅拌器、自动部分收集器、紫外检测仪、梯度混合器、电泳装置、玻璃仪器等。
四、操作方法
牛乳→醋酸钠缓冲液→离心→洗涤（乙醚、乙醇）→进一步粗提纯→双缩脲（紫外）测定→上柱→SDS电泳
五、关键步骤与注意事项
①等电点调节准确
②双缩脲测定含量不能超出曲线范围
③上柱样量适宜,SDS上样量适宜
六、思考题
1、在提取细胞色素C的过程中，需注意什么？
2、在装柱的过程中，注意哪些？
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