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实验题目:紫外吸收法测定核酸含量 教 师:XXX
实验类型:基础 学 时:4(参考)
内 容:
一、实验目的 学习掌握用紫外吸收法测定核酸含量的原理和方法
二、实验原理 核苷、核苷酸、核酸的组成成分中都有嘌呤、嘧啶碱基,这些碱基全含有共轭双键,它能强烈吸收250-280毫微米波段的紫外光。最大吸收在260纳米左右。
三、试剂与器材 紫外分光光度计、离心机等。钼酸铵-过氯酸沉淀剂、RNA或DNA干粉、5%~6%氨水
四、操作方法 ① 绘制DNA在不同波长下的光吸收曲线
② 测定并计算两种核酸样品的含量
五、关键步骤与注意事项
蛋白质和核苷酸影响测定,一定要排除
六、思考题 1、在绘制吸收曲线时应注意哪些?
2、说明使用分光光度计时,比色皿对所测样品的结果有无影响,该怎样处理?
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